移液器校准方法谈
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当前针对移液器计量结果的检测、验证，主流或主要的方法是采用衡量法！关于这一点，我们上海巴玖实业有限公司针对我们的客户进行过讲解，绝大多数都是选择这一方法——也被称之为“称重法”。之所以被通称为“称重法”是因为该方法的原理是通过天平对移液器计量的一定容量的液体进行称重，并以此数据为依据从而推断出移液器计量结果的实际值——即容量。
具体操作步骤：
1、准备超纯水、万分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之一的天平）、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，防止水分挥发。
2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别进行第三和第四步。
3、吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复10次。
4、将测量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。
5、根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。
6、重复3、4步，直至偏差在ISO8655的要求内为止。
从这一方法的原理显然可以看出，“衡量法（或称重法）“校准过程极容易受到如下因素的影响。
1 温度，因为分光光度法同样需要使用到液体即溶剂，一定质量量的溶剂，其容积同样受到温度的影响而变化。但如果在用户所在的场所对移液器进行校准，则此影响 可以不计，因为某一个具体用户所在的场所内的温度变化，相对来说是固定的，那么这种由温度带来的影响，同样也会存在于用户实际工作中，因此这两者是可以相 互抵消的（上海巴玖实业有限公司备注：目前在该领域较为成熟的技术来自于美国一家实验室）；
2 气压，同温度带来的影响一样，由气压带来的影响也是可以相互抵消的；
3 操作人员的操作习惯带来的影响，因为分光光度法是可以被直接在终端用户使用场所应用的一种移液器校准方法，其操作方法相对于传统的衡量法（或称重法）更为 简单、可靠，因此完全可由移液器的使用者来直接对其使用的移液器采用分光光度法进行校准。这样操作者的操作习惯在校准过程中表现出来的差异同样存在与今后 的使用过程中，这两者之间的差异也可以相互抵消的；
4 环境湿度，因为分光光度法不是对移液器排出的溶剂进行称量，而是对溶剂中所包含的特殊物质的光波进行测量，同时这种特殊物质是不可挥发的，因此在整个测试 过程中，其已经通过移液器排出的溶剂，无论其质量如何变化，但结果是不会受到影响的，也就是不需要对环境的干湿度进行控制。
因为终端用 户处的环境，是千差万别的，有的甚至高于这些专业的实验室，但更多的则是远远低于这些专业的实验室。因此常常遇到在专业的实验室里校准合格的移液器，当终 端用户在自己的工作场所重新校准时，却发现其结果并不理想。这不一定是移液器质量出现问题，常常是因为校准的场所的环境改变了、校准的人员改变了，从而上 述影响校准结果的各种因素也改变了。而解决这一问题的[much]有效的办法就是直接去到终端用户的实际使用场所去对用户的移液器进行校准，这样得到的校准结果对特 定的用户来说才是[much]真实的！
我们当然可以将专业的实验室的仪器、设备，如高精度电子天平、专业技术人员、环境控制的等各种设备搬迁至终端用户处进行校准，但这显然是不经济的，也是行不通的。因为有些仪器，比如高精度电子天平，一旦离开了原本固定的使用场所，是需要重新校准合格才可以使用的。
全新的移液器校准方法——分光光度法。
分光光度法校准原理是将混合有特殊物质的液体——即溶剂(英文solution)，通过移液器量取后注入目标容器，然后通过使用特定的滤波片过滤掉一部分不需要的波长的光后，再对剩余的特定的波长的光进行测量，从而由此计算出移液器实际吸取和排出的液体——即溶剂。
当然， 目前分光光度法作为一种针对移液器校准的新的应用方法还是刚刚兴起，在国外也只有少数研究机构或实验室在使用，在我国目前仅停留在理论层面的评估上，并没 有在实际中推广、应用。因此根据我们上海巴玖实业有限公司多年的行业经验认为，这种新型的针对移液器校准的方法，在不久的将来，将会得到更多用户的肯定与承认。
两种方法都是可以行的，其实分光光度法和传统的重量测定法相结合，能够更加[accurate]的校准移液器的偏差，有效减少两个校准方法中测量因素对校准结果带来的偏差。
